Uso de Northern Blotting en la detección y análisis del HIV

El VIH-1 tiene varios elementos promotores que regulan su actividad y expresión; el YY1, que se trata de un factor de transcripción, puede llegar a regular la infección latente y la expresión génica del VIH-1. Con el uso de la técnica del Northern blotting se estudian todos los derivados del ARNm del VIH-1, tales como los no empalmados, empalmados simples y empalmados múltiples, para evidenciar una mayor producción en las células que sobreexpresan el YY1.

Figura 1: (B) Muestra el uso de el northern blotting en el ARNm del VIH-1.

Referencias bibliográficas:

1. Yu KL, Jung YM, Park SH, Lee SD, You JC. Human transcription factor YY1 could upregulate the HIV-1 gene expression. BMB Rep [Internet]. 2020;53(5):248–53. Disponible en: http://dx.doi.org/10.5483/bmbrep.2020.53.5.222

Técnicas de PCR en el diagnóstico de el SARS-CoV-2

TEMA: Método diagnóstico de la mutación D614G en el SARS-CoV-2.

OBJETIVOS: Optimización y mejora del método PCR-RFLP para la detección de D614G en el SARS-CoV-2.

MUESTRA BIOLÓGICA: Hisopado nasal

TIPO DE ÁCIDO NUCLEICO A SER EXTRAÍDO: ARN viral a ADNc mediante síntesis a temperatura de 50° durante 30 minutos.

GEN O SECUENCIA A AMPLIFICAR: (590 pb

)Gen codificante de la proteína S, D614G

TIPO DE PCR: PCR-RFLP

Pasos:

- Desnaturalización primaria: 95 ºC - 10 minutos

- Desnaturalización: 95 ºC - 30 segundos

- Alineamiento: 60 ºC - 30 segundos

- Extensión: 72ºC - 60 segundos

VISUALIZACIÓN: Electroforesis; gel de agarosa al 1,5%.

Referencias bibliográficas: 

1. Hashemi SA, Khoshi A, Ghasemzadeh-moghaddam H, Ghafouri M, Taghavi M, Namdar-Ahmadabad H, et al. Development of a PCR-RFLP method for detection of D614G mutation in SARS-CoV-2. Infect Genet Evol [Internet]. 2020 [Consultado 17 dic 2023];86(104625):104625. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1567134820304561

Alteración de la epigenética en el Cáncer de próstata

Al afectarse procesos como la metilación de la citidina en la región promotora del gen GSTP1, habría pérdida de codificación de enzimas importantes en la protección del ADN. Efecto del daño en la regulación de los patrones de expresión.

Obtenido de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/core/lw/2.0/html/tileshop_pmc/tileshop_pmc_inline.html?title=Click%20on%20image%20to%20zoom&p=PMC3&id=8350251_tau-10-07-3104-f1.jpg

Referencias bibliográficas:

1. Conteduca V, Hess J, Yamada Y, Ku S-Y, Beltran H. Epigenetics in prostate cancer: clinical implications. Transl Androl Urol [Internet]. 2021 [consultado 10 dic 2023];10(7):3104–16. Disponible en: http://dx.doi.org/10.21037/tau-20-1339

Alteraciones de la traducción en el Cáncer de Mama

Adicional, estas alteraciones son propicias para la neoplasia y metástasis; pues la desregulación de la traducción del mRNA favorece la plasticidad del cáncer que por el otro lado provoca la una alteración consecuente de la síntesis de proteínas.(1)

Obtenido de: https://youtu.be/KyeiZJrWrys?si=m2VX5i0DI_yaodpj

Referencias bibliográficas: 

1. Lee LJ, Papadopoli D, Jewer M, del Rincon S, Topisirovic I, Lawrence MG, et al. Cancer plasticity: The role of mRNA translation. Trends Cancer [Internet]. 2021 [Consultado el 3 dic 2023];7(2):134–45. Disponible en: https://doi.org/10.1016/j.trecan.2020.09.005